局部诱导（第8天）
在皮内注射区域上方，用2cm×4cm的滤纸浸透受试物（或其浸提液），覆盖注射点。
用封闭敷料固定滤纸，持续48小时。
对于无刺激性的受试物，可在敷贴前24小时在皮肤上涂抹10%十二烷基硫酸钠（SLS），以增强致敏效果。
激发阶段（第22天）
在豚鼠背部另一侧剃毛区域（约2cm×2cm），局部敷贴受试物（或其浸提液），持续24小时。
对照组使用空白溶剂或已知非致敏物进行相同操作。
观察与评分（激发后24小时、48小时、72小时）
根据Magnusson和Kligman分级标准，对皮肤反应进行评分：
0级：无反应。
1级：轻微红斑。
2级：中度红斑。
3级：重度红斑和水肿。
4级：重度红斑、水肿，伴有焦痂形成。
计算每组的平均反应分数，并进行统计学分析。
结果判定
致敏阳性：试验组动物的平均反应分数显著高于对照组（通常p<0.05），且至少有一只动物出现2级或以上反应。
致敏阴性：试验组与对照组无显著差异，或反应轻微（≤1级）。
优缺点
优点：
灵敏度高，适用于单一化学物质的致敏性评价。
结果可靠，被广泛接受为皮肤致敏试验的“金标准”。
缺点：
动物使用量大，伦理争议较多。
试验周期长（约3周），成本较高。
可能出现假阳性或假阴性结果，需结合其他试验方法（如局部淋巴结试验，LLNA）进行验证。
替代方法
近年来，局部淋巴结试验（LLNA）因其更少的动物使用量和更短的试验周期，逐渐成为GPMT的替代方法。LLNA通过测量淋巴细胞增殖程度来评估致敏性，结果更客观，且符合3R原则（减少、替代、优化）。
结论
豚鼠最大剂量法（GPMT）是一种经典的皮肤致敏试验方法，适用于评估化学物质的致敏潜能。尽管其存在一定的局限性，但在某些领域仍具有不可替代的作用。随着替代方法的发展，GPMT的应用可能会逐渐减少，但在当前仍是一种重要的安全性评价工具。返回搜狐，查看更多